Ameliorative effects of Lactobacillus against Aflatoxin B1

Abstract Lactobacilli are probiotics with Aflatoxin (AF) detoxification ability, found in fermented products, GIT of animals and environment. Purpose of this study was to investigate the ability of broiler isolates of Lactobacillus against Aflatoxin B1 (AFB1). For this purpose, 5 isolates of Lactobacillus from broiler gut were incubated with 100 ppb AFB1 in aqueous environment and effect of different parameters (cell fractions, time, temperature, pH) on detoxification was determined by HPLC. The ameliorative effect of Lactobacillus salivarius (LS) against AFB1 was studied in broiler. The results revealed that LS (CR. 4) showed the best results (in vitro) as compared to other isolates (L. salivarius (CR. 3, CR, 4), L. agilis (CE. 2.1, CE. 3.1) and L. crispatus (CE. 28). Cell debris of CR. 4 showed significantly higher detoxification (P 0.05). Maximum amount of AFB1 was detoxified at 30°C (97%), pH 4.0 (99%) and 6 h (99.97%). In vivo study showed that AFB1 decreased weight gain (1,269 ± 0.04 gm/ bird), feed consumed (2,161 ± 0.08 gm/ bird), serum total protein (2.42 ± 0.34 gm/ dl), serum albumin (0.5 ± 0.2 2 gm/dl) and antibody titer (4.2 ± 0.83). Liver function enzymes were found (alanine transaminase (ALT): 32 ± 10.7 U/L) and aspartate transaminase (AST): 314.8 ± 27 U/L) elevated in AFB1 fed broilers. Treatment with 1% LS not only decreased the toxic effects of AFB1 (group D) but also improved the overall health of broilers due to its probiotic effects (p 0.05) as compared to control negative (group A). The detoxification ability of LS was better than commercial binder (CB) (0.2% Protmyc). It was concluded that detoxification of AFB1 by Lactobacillus was strain, temperature, pH and time dependent. LS has detoxification ability against AFB1 in vivo.

Resumo Os lactobacilos são probióticos com capacidade de desintoxicação da Aflatoxina (AF), encontrados em produtos fermentados, TGI de animais e meio ambiente. O objetivo deste estudo foi investigar a capacidade de isolados de frango de corte de Lactobacillus contra a Aflatoxina B1 (AFB1). Para tanto, 5 isolados de Lactobacillus de intestino de frango foram incubados com 100 ppb AFB1 em meio aquoso, e o efeito de diferentes parâmetros (frações celulares, tempo, temperatura, pH) na desintoxicação foi determinado por CLAE. O efeito melhorador de Lactobacillus salivarius (LS) contra AFB1 foi estudado em frangos de corte. Os resultados revelaram que LS (CR. 4) apresentou os melhores resultados (in vitro) em comparação com outros isolados [L. salivarius (CR. 3, CR. 4), L. agilis (CE. 2.1, CE. 3.1) e L. crispatus (CE. 28)]. Detritos celulares de CR. 4 mostraram desintoxicação significativamente maior (P 0.05). A quantidade máxima de AFB1 foi desintoxicada a 30 °C (97%), pH 4.0 (99%) e 6 h (99,97%). O estudo in vivo mostrou que AFB1 diminuiu o ganho de peso (1,269 ± 0.04 g / ave), alimento consumido (2,161 ± 0.08 g / ave), proteína total sérica (2.42 ± 0.34 g / dl), albumina sérica (0.5 ± 0.22 gm / dl) e título de anticorpo (4.2 ± 0.83). As enzimas da função hepática foram encontradas (alanina transaminase (ALT): 32 ± 10.7 U / L) e aspartato transaminase (AST): 314.8 ± 27 U / L) elevadas em AFB1 alimentados com frangos. O tratamento com 1% LS não só diminuiu os efeitos tóxicos de AFB1 (grupo D), mas também melhorou a saúde geral dos frangos devido aos seus efeitos probióticos (p 0.05) em comparação com o controle negativo (grupo A). A capacidade de desintoxicação do LS foi melhor do que o aglutinante comercial (CB) (0.2% Protmyc). Concluiu-se que a desintoxicação de AFB1 por Lactobacillus foi dependente da cepa, temperatura, pH e tempo. LS tem capacidade de desintoxicação contra AFB1 in vivo.

Ameliorative effects of Lactobacillus against Aflatoxin B1 / Efeitos benéficos do Lactobacillus contra a Aflatoxin B1

Abstract Lactobacilli are probiotics with Aflatoxin (AF) detoxification ability, found in fermented products, GIT of animals and environment. Purpose of this study was to investigate the ability of broiler isolates of Lactobacillus against Aflatoxin B1 (AFB1). For this purpose, 5 isolates of Lactobacillus from broiler gut were incubated with 100 ppb AFB1 in aqueous environment and effect of different parameters (cell fractions, time, temperature, pH) on detoxification was determined by HPLC. The ameliorative effect of Lactobacillus salivarius (LS) against AFB1 was studied in broiler. The results revealed that LS (CR. 4) showed the best results (in vitro) as compared to other isolates (L. salivarius (CR. 3, CR, 4), L. agilis (CE. 2.1, CE. 3.1) and L. crispatus (CE. 28). Cell debris of CR. 4 showed significantly higher detoxification (P<0.05). Maximum amount of AFB1 was detoxified at 30°C (97%), pH 4.0 (99%) and 6 h (99.97%). In vivo study showed that AFB1 decreased weight gain (1,269 ± 0.04 gm/ bird), feed consumed (2,161 ± 0.08 gm/ bird), serum total protein (2.42 ± 0.34 gm/ dl), serum albumin (0.5 ± 0.2 2 gm/dl) and antibody titer (4.2 ± 0.83). Liver function enzymes were found (alanine transaminase (ALT): 32 ± 10.7 U/L) and aspartate transaminase (AST): 314.8 ± 27 U/L) elevated in AFB1 fed broilers. Treatment with 1% LS not only decreased the toxic effects of AFB1 (group D) but also improved the overall health of broilers due to its probiotic effects (p<0.05) as compared to control negative (group A). The detoxification ability of LS was better than commercial binder (CB) (0.2% Protmyc). It was concluded that detoxification of AFB1 by Lactobacillus was strain, temperature, pH and time dependent. LS has detoxification ability against AFB1 in vivo.

Resumo Os lactobacilos são probióticos com capacidade de desintoxicação da Aflatoxina (AF), encontrados em produtos fermentados, TGI de animais e meio ambiente. O objetivo deste estudo foi investigar a capacidade de isolados de frango de corte de Lactobacillus contra a Aflatoxina B1 (AFB1). Para tanto, 5 isolados de Lactobacillus de intestino de frango foram incubados com 100 ppb AFB1 em meio aquoso, e o efeito de diferentes parâmetros (frações celulares, tempo, temperatura, pH) na desintoxicação foi determinado por CLAE. O efeito melhorador de Lactobacillus salivarius (LS) contra AFB1 foi estudado em frangos de corte. Os resultados revelaram que LS (CR. 4) apresentou os melhores resultados (in vitro) em comparação com outros isolados [L. salivarius (CR. 3, CR. 4), L. agilis (CE. 2.1, CE. 3.1) e L. crispatus (CE. 28)]. Detritos celulares de CR. 4 mostraram desintoxicação significativamente maior (P < 0.05). A quantidade máxima de AFB1 foi desintoxicada a 30 °C (97%), pH 4.0 (99%) e 6 h (99,97%). O estudo in vivo mostrou que AFB1 diminuiu o ganho de peso (1,269 ± 0.04 g / ave), alimento consumido (2,161 ± 0.08 g / ave), proteína total sérica (2.42 ± 0.34 g / dl), albumina sérica (0.5 ± 0.22 gm / dl) e título de anticorpo (4.2 ± 0.83). As enzimas da função hepática foram encontradas (alanina transaminase (ALT): 32 ± 10.7 U / L) e aspartato transaminase (AST): 314.8 ± 27 U / L) elevadas em AFB1 alimentados com frangos. O tratamento com 1% LS não só diminuiu os efeitos tóxicos de AFB1 (grupo D), mas também melhorou a saúde geral dos frangos devido aos seus efeitos probióticos (p < 0.05) em comparação com o controle negativo (grupo A). A capacidade de desintoxicação do LS foi melhor do que o aglutinante comercial (CB) (0.2% Protmyc). Concluiu-se que a desintoxicação de AFB1 por Lactobacillus foi dependente da cepa, temperatura, pH e tempo. LS tem capacidade de desintoxicação contra AFB1 in vivo.

Molecular identification of genus Pipistrellus (Mammalia: Chiroptera) from Fata region, Pakistan / Identificação molecular do gênero Pipistrellus (Mammalia: Chiroptera) da região de Fáta, Paquistão

A total of 10 specimens were captured from selected sites of Bajaur Agency FATA, Pakistan using mist nets. The captured specimens were morphologically identified and various morphometric measurements were taken. The head and Body length (HB) of Pipistrellus coromondra and Pipistrellus kuhlii lepidus (n=10) was 43±0.11 mm and 45±1.1 respectively. Morphologically identified Pipistrellus kuhlii confirmed as Pipistrellus kuhlii lepidus based on 16S rRNA sequences. The DNA sequences were submitted to GenBank and accession numbers were obtained (MN719478 and MT430902). The available 16S rRNA gene sequences of Pipistrellus coromondra and Pipistrellus kuhlii lepidus were retrieved from NCBI and incorporated in N-J tree analysis. Overall, the interspecific genetic variations among Pipistrellus coromondra and Pipistrellus kuhlii lepidus were 8% and 1% respectively. In our recommendation, a comprehensive molecular identification of bats is need of hour to report more cryptic and new species from Pakistan.

Um total de 10 espécimes foi capturado em locais selecionados da Bajaur Agency FATA, Paquistão, usando redes de neblina. Os espécimes capturados foram identificados morfologicamente e várias medidas morfométricas foram realizadas. O comprimento da cabeça e do corpo (HB) de Pipistrellus coromondra e Pipistrellus kuhlii lepidus (n = 10) foi de 43 ± 0,11 mm e 45 ± 1,1, respectivamente. Pipistrellus kuhlii identificado morfologicamente e confirmado como Pipistrellus kuhlii lepidus com base em sequências de rRNA 16S. As sequências de DNA foram submetidas ao GenBank e os números de acesso foram obtidos (MN 719478 e MT430902). As sequências do gene 16S rRNA disponíveis de Pipistrellus coromondra e Pipistrellus kuhlii lepidus foram recuperadas do NCBI e incorporadas na análise da árvore N-J. No geral, as variações genéticas interespecíficas entre Pipistrellus coromondra e Pipistrellus kuhlii lepidus foram de 8% e 1%, respectivamente. Em nossa recomendação, uma identificação molecular abrangente de morcegos precisa de uma hora para relatar mais espécies crípticas e novas do Paquistão.

Molecular identification of genus Pipistrellus (Mammalia: Chiroptera) from Fata region, Pakistan

Abstract A total of 10 specimens were captured from selected sites of Bajaur Agency FATA, Pakistan using mist nets. The captured specimens were morphologically identified and various morphometric measurements were taken. The head and Body length (HB) of Pipistrellus coromondra and Pipistrellus kuhlii lepidus (n=10) was 43±0.11 mm and 45±1.1 respectively. Morphologically identified Pipistrellus kuhlii confirmed as Pipistrellus kuhlii lepidus based on 16S rRNA sequences. The DNA sequences were submitted to GenBank and accession numbers were obtained (MN 719478 and MT430902). The available 16S rRNA gene sequences of Pipistrellus coromondra and Pipistrellus kuhlii lepidus were retrieved from NCBI and incorporated in N-J tree analysis. Overall, the interspecific genetic variations among Pipistrellus coromondra and Pipistrellus kuhlii lepidus were 8% and 1% respectively. In our recommendation, a comprehensive molecular identification of bats is need of hour to report more cryptic and new species from Pakistan.

Resumo Um total de 10 espécimes foi capturado em locais selecionados da Bajaur Agency FATA, Paquistão, usando redes de neblina. Os espécimes capturados foram identificados morfologicamente e várias medidas morfométricas foram realizadas. O comprimento da cabeça e do corpo (HB) de Pipistrellus coromondra e Pipistrellus kuhlii lepidus (n = 10) foi de 43 ± 0,11 mm e 45 ± 1,1, respectivamente. Pipistrellus kuhlii identificado morfologicamente e confirmado como Pipistrellus kuhlii lepidus com base em sequências de rRNA 16S. As sequências de DNA foram submetidas ao GenBank e os números de acesso foram obtidos (MN 719478 e MT430902). As sequências do gene 16S rRNA disponíveis de Pipistrellus coromondra e Pipistrellus kuhlii lepidus foram recuperadas do NCBI e incorporadas na análise da árvore N-J. No geral, as variações genéticas interespecíficas entre Pipistrellus coromondra e Pipistrellus kuhlii lepidus foram de 8% e 1%, respectivamente. Em nossa recomendação, uma identificação molecular abrangente de morcegos precisa de uma hora para relatar mais espécies crípticas e novas do Paquistão.

Molecular identification of genus Pipistrellus (Mammalia: Chiroptera) from Fata region, Pakistan / Identificação molecular do gênero Pipistrellus (Mammalia: Chiroptera) da região de Fáta, Paquistão

Abstract A total of 10 specimens were captured from selected sites of Bajaur Agency FATA, Pakistan using mist nets. The captured specimens were morphologically identified and various morphometric measurements were taken. The head and Body length (HB) of Pipistrellus coromondra and Pipistrellus kuhlii lepidus (n=10) was 43±0.11 mm and 45±1.1 respectively. Morphologically identified Pipistrellus kuhlii confirmed as Pipistrellus kuhlii lepidus based on 16S rRNA sequences. The DNA sequences were submitted to GenBank and accession numbers were obtained (MN 719478 and MT430902). The available 16S rRNA gene sequences of Pipistrellus coromondra and Pipistrellus kuhlii lepidus were retrieved from NCBI and incorporated in N-J tree analysis. Overall, the interspecific genetic variations among Pipistrellus coromondra and Pipistrellus kuhlii lepidus were 8% and 1% respectively. In our recommendation, a comprehensive molecular identification of bats is need of hour to report more cryptic and new species from Pakistan.

Resumo Um total de 10 espécimes foi capturado em locais selecionados da Bajaur Agency FATA, Paquistão, usando redes de neblina. Os espécimes capturados foram identificados morfologicamente e várias medidas morfométricas foram realizadas. O comprimento da cabeça e do corpo (HB) de Pipistrellus coromondra e Pipistrellus kuhlii lepidus (n = 10) foi de 43 ± 0,11 mm e 45 ± 1,1, respectivamente. Pipistrellus kuhlii identificado morfologicamente e confirmado como Pipistrellus kuhlii lepidus com base em sequências de rRNA 16S. As sequências de DNA foram submetidas ao GenBank e os números de acesso foram obtidos (MN 719478 e MT430902). As sequências do gene 16S rRNA disponíveis de Pipistrellus coromondra e Pipistrellus kuhlii lepidus foram recuperadas do NCBI e incorporadas na análise da árvore N-J. No geral, as variações genéticas interespecíficas entre Pipistrellus coromondra e Pipistrellus kuhlii lepidus foram de 8% e 1%, respectivamente. Em nossa recomendação, uma identificação molecular abrangente de morcegos precisa de uma hora para relatar mais espécies crípticas e novas do Paquistão.